一本真正的生物实验书
一、制备生物组织样品溶液
(1)取约5ml袋装牛奶,置于小烧杯中,用适量水稀释。
(2)将稀释液搅拌至溶液均匀,取约2ml于试管中。
二、实验操作方法和观察
(1)制备缩二脲试剂。根据计算,0.1g/ml NaOH溶液(缩二脲ⅰ)的量浓度约为2.5mol/L(如图1);?0.01g/ml CuSO4溶液(缩二脲ⅱ),物质浓度约为0.06mol/L(如图2)。
(2)进行实验。取2ml缩二脲I,与稀释剂充分混合;过一会儿,加入缩二脲ⅱ,摇匀至出现紫色沉淀(如图3)。
第三,实验总结表明,在碱性条件下,白色牛奶与蓝色硫酸铜溶液进行缩二脲试验,产生紫色物质。证明牛奶含有蛋白质。五、反应机理缩二脲试验是肽和蛋白质所特有的,但却是氨基酸所不具备的显色反应。通常,含有两个氨基甲基(即肽键:-CO-NH2-)的化合物与碱性铜溶液反应形成紫色或蓝紫色络合物。利用这个反应,可以用分光光度计测定蛋白质的含量。?在强碱性溶液中,缩二脲与CuSO4形成紫色络合物,称为缩二脲试验。所有有两个酰胺基或两个直接相连的肽键,或可以通过一个中间碳原子相连的肽键的化合物都有缩二脲试验。