ibdv的中文翻译

传染性法氏囊病病毒结构蛋白vp3基因的克隆及原核表达

3基因的克隆和原核表达

秦川康颗粒对ibdv感染鸡免疫器官的影响

法氏囊病病毒感染对鸡免疫器官病理学的影响

传染性法氏囊病病毒是鸡的一种重要病原

传染性法氏囊病病毒是鸡的重要病原。

本研究为有效控制鸡传染性法氏囊病开辟了新的途径

本文对ibdv的遗传免疫进行了研究,旨在为ibd的预防和治疗提供新的途径。

表明建立的初级rt - pcr和巢式pcr是快速诊断ibdv的方法

这为ibd的快速临床诊断提供了一种有用而可靠的新技术。

结果表明,vp2亲水区与ibdv的抗原变异体和毒力有很强的亲和力

结果表明,vp2与ibdv毒株的毒力和抗原变异密切相关。

随着鸡传染性法氏囊病病毒及其变异株的出现,对鸡传染性法氏囊病病毒抗原和毒力的研究显得尤为重要

随着鸡传染性法氏囊病病毒及其变异株的发现,研究鸡传染性法氏囊病病毒的抗原变异和毒力显得尤为重要。

用cam或cef对23份阳性标本进行了病毒分离。我们只得到11株ibdv

在此基础上设计的巢式pcr大大提高了阳性检出率(提高了52。1).

还讨论了对ibdv抗原性或致病性重要的区域和氨基酸

这说明河北省与周边省市的法氏囊病毒株存在交叉感染和相互影响。

上述结果清楚地证明了在转基因烟草中产生的重组ibdv vp2是免疫原性的

上述结果表明,烟草中产生的ibdvvp2重组蛋白具有免疫功能,能与ibdv特异性抗体发生反应。

间接免疫荧光试验和酶联免疫吸附试验(epsa)表明,表达蛋白可与鸡抗ibdv血清发生反应

Dna疫苗对bc6 85、zj2000、zj991三种强毒株均有较好的免疫保护效果,平均保护率为83。

通过pcr证实ibdv vp2基因已整合到核染色体dna中。通过southern印迹对pcr阳性植物的重组蛋白基因的掺入进行双重检查

在转基因组织长成植物的过程中,vp2基因随着植物细胞的生长而表达。

由于初次rt - pcr和巢式pcr的产物都经过vp2基因的高变区,因此可以直接进行限制性酶切分析

其次,本研究中基本rt-pcr和巢式pcr扩增的片段都跨越了ibdv的vvp2,因此可以直接研究pcr产物的酶切情况。

本文简要介绍了ibdv基因组结构和功能、分子诊断方法和变异的分子基础等方面的研究进展

本文综述了传染性法氏囊病病毒的基因组结构和功能、分子生物学诊断方法以及病毒变异的分子基础等方面的研究进展。

以免疫刺激复合物(is)为佐剂,研制了zj2000株和jd1株的pci - vp2 / vp4 / vp3、pcdna3 - vp2 / vp4 / vp3、pci - vp2、pcdna3 - vp2系列dna疫苗

33 ;减毒疫苗b87虽然对bc6 85株有较好的保护作用,但对zj991株和zj2000株的攻击不理想,平均保护率仅为60。

传染性法氏囊病病毒(ibdv)是传染性法氏囊病(ibd)的病原体,它通过破坏法氏囊内的b淋巴细胞前体而引起雏鸡的免疫抑制

传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病病毒引起的一种急性接触性传染病,是危害世界养禽业的主要传染病之一。

为了理解目前的商业疫苗也可以保护鸡免受wid dv攻击,对疫苗a和b在spf鸡中针对wid dv株gx8 / 99的保护性免疫效力进行了测试和比较

在spf鸡中,比较研究了两种中强毒ibdv疫苗对法氏囊和胸腺的作用,以及对超强毒gx 8 99的免疫保护作用。

vp2的hv区在sd - 3 / 98、js30 / 99和hk46之间有100 %的同源性。证明新毒株gx8 / 99在致病性和vp2基因上都发生了变化

Sd l 97、sd 3 98和js 30 99彼此之间以及与ibdv参考毒株hk46具有高度同源性。这一结果似乎表明,ibdv毒株的致病性与vpz基因高变区的变异关系不大。

传统的灭活或减毒疫苗不能提供足够的保护。因此,有望开发出新一代更有效、更安全的疫苗。本研究的目的是研制抗ibdv的dna疫苗

用弱毒疫苗和灭活疫苗免疫鸡是目前预防和治疗ibd的主要方法,但随着ibdv变异株和超强毒株的出现,免疫失败时常发生。

相对而言,新毒株gx8 / 99与参考毒株hk46和其他3个野毒株的同源性较低。8 % - 97 .2 %,比hk46和3个毒株、gx8 / 99毒株间的同源性高98%。4 % - 98 .6 %在dna或aa水平

为了研究病毒核酸分子结构与其致病性的关系,选择了4株不同致死率的ibdv野毒株,对其vpz高变区***494碱基序列进行了比较。

核酸探针的特异性非常严格。它只与iltv dna呈阳性反应,而与nd v、bv和ibdv的核酸呈阴性反应。这种探头的灵敏度很高。ilt甚至可以检测20pg的iltv dna

结果表明,该核酸探针具有高度的特异性,仅与iltv的dna呈阳性反应,而与新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒和传染性支气管炎病毒的核酸呈阴性反应。该探针灵敏度高,可检测20pg的iltv dna。

用鸡传染性法氏囊病病毒e血清型变异株经泄殖腔、鼻腔和尿囊腔途径接种鸡和鸡胚,系统观察了不同时间间隔感染鸡法氏囊的组织病理学特征

本试验通过泄殖腔、鼻腔和尿囊腔接种雏鸡和鸡胚,全面系统地观察了不同时间法氏囊的组织学变化。

结果表明,这3个分离物均为传染性法氏囊病病毒。o病毒基因组片段a的全长cdna,一个强毒株ibdv zj2000和一个弱毒株ibdv jd1,通过长精确反转录聚合酶链反应(la - pcr)一步扩增,克隆入pgem - t easy载体并测序

以传染性法氏囊病病毒zj2000株(野毒株)和jd1株(弱毒株)基因组dsrna为模板,采用一步法la-pcr扩增并克隆了这两种病毒A片段的全长cdna。

结果还表明,近年来收集到的大多数ibdv毒株的毒力是典型的极强毒株和标准毒株。用20 - 2000 eld50的法氏囊悬液对不同日龄spf鸡和商品蛋鸡进行了重复试验,研究了ibdv强毒株gx8 / 99的致死性

选择致病性最强的广西Gx8 99菌株。在定量测定了病毒在法氏囊悬液中对鸡胚的致死剂量(eld 50)后,对该毒株在不同日龄spf鸡和商品代蛋码头的致病性进行了反复比较研究。

特异性阻断试验和交叉反应试验证明dot - epsa的高度特异性,其中诊断隔膜不与抗ibdv、ibv、eds - 76、pox、ibv、iltv、沙门氏菌jc的阳性血清反应。批内试验和批间试验均证明该方法或诊断膜是稳定的。在4c条件下储存至少6个月,诊断隔膜的灵敏度和特异性没有变化

阻断试验和交叉试验表明,该快速诊断膜具有良好的特异性:不与马立克氏病、法氏囊、水痘、鸡传支、鸡传喉、鸡减蛋综合征、鸡传鼻、鸡沙门氏菌等阳性血清反应。批内和批间重复性试验表明,该方法具有良好的重复性。诊断隔膜4可保存至少6个月,其特异性和灵敏度保持不变。

从浙江省杭州、深州、宁波等地发病鸡群的法氏囊上分离到3株ibdv毒株,分别命名为zj2000、zj991和zj992。在琼脂免疫扩散试验中,分离株能与ibdv阳性参考血清发生反应,在鸡胚中传代时死亡率为30 - 6543 8+000 %。用这些分离物接种的鸡表现出典型的传染性法氏囊病的临床和病理症状

从浙江杭州、嵊州、宁波等地疑似暴发疫情的鸡群中采集IBD(编号zj2000,zj991,zj992)样品,进行病毒分离。通过琼脂免疫扩散试验、动物回归试验、鸡胚回归试验和电镜观察,证实这3株野生病毒为IBD病毒。

本论文对中国传染性法氏囊病病毒河北分离株h B- BP a段进行了序列测定和系统进化分析。试验内容如下:从接种hb - bp毒株的鸡上收获法氏囊48小时后,用pcl梯度沉淀法纯化病毒基因组双链rna。参照公开的序列设计并合成引物

用传染性法氏囊病病毒hb-bp株人工接种4周龄spf雏鸡。48h后,用双pcl分级沉淀法纯化全长基因组dsrna,设计一对引物,用rt-pcr法进行体外扩增,获得了hb株A段基因的全长cdna。

21日龄Spf鸡用胚性或细胞性传染性法氏囊病油乳剂疫苗进行皮下感染,并用超滤法获得的不同剂量囊素进行肌肉注射。证明鸡和鸭的囊素能缩短诱导抗ibdv抗体的时间,提高血清抗体水平。它们使鸡在短时间内获得很强的免疫能力。感染0组的agp pters。4mlcbs + ibdv的生发和0。8mlcbs + ibdv的细胞或0。胚芽和细胞的8mldbs + ibdv平均比免疫对照组高约2个月。用滴眼法将ibdv pve疫苗与不同剂量的冻干囊素混合后接种鸡。结果表明,不同剂量的cbs或dbs均能提高不同日龄鸡对ibdv的抗体诱导力。它们还可能减轻活化病毒对法氏囊的免疫损伤。并促进损伤的修复。发现bs能提高体重增长和饲料转化率

21日龄spf鸡肌肉注射不同剂量,颈部皮下注射ibd胚胎毒素或细胞毒灭活疫苗。结果表明,鸡和鸭传染性法氏囊病活性肽均能缩短ibd油疫苗诱导抗体产生的时间,提高抗体水平,使鸡在较短时间内获得较强的免疫力。agp抗体滴度为0。4mlcbs胚胎毒性组和0。8mlcbs细胞毒组或0。8mldbs胚胎毒性和细胞毒性组平均比免疫对照组高2个滴度。结果表明,不同剂量的cbs和dbs均能促进不同日龄鸡体内ibd抗体的产生。还能减少减毒病毒对鸡法氏囊组织的损伤,加速其修复。

Northern杂交分析表明外源ibdv vp2基因被正确转录成mrna。使用ibdv特异性抗血清,通过dot - epsa和western blot检测来自烟草叶的再结合蛋白。在烟草中表达的ibdv vp2蛋白的表观分子量为52kd

通过pcr和southern杂交,外源基因ibdvvp2成功整合到烟草染色体中。Northern杂交分析表明,转基因烟草中存在正确转录的ibdvvp2基因mRNA。Dot-epsa和westernblot分析证实,在转基因烟草中产生了ibdv抗原蛋白,可与ibdv特异性抗血清发生反应,其大小约为50kd。

上述工作为进一步研究ibdv抗原漂移和毒力变异的分子生物学机制、分子流行病学奠定了基础,也为ibdv重组和基因缺失疫苗的研制提供了依据

本实验有助于我们进一步探索ibdv抗原漂移和毒力变化的分子生物学机制,追溯ibdv的起源,了解病毒的传播方式。同时,也为基因重组疫苗和缺失疫苗的开发奠定了一定的基础。