高考血细胞计数器通用考点
■一、高考真题
■ 1.(2008年江苏省高考第31题)(4)整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中数培养液是错误的，正确的方法是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。
(5)实验结束后，用蘸有洗涤剂的管刷擦洗血细胞计数板是错误的，正确的方法是_ _ _ _ _ _ _ _ _。
■分析题的设计从血细胞计数板的实验方法入手，需要判断实验操作的对错。静止培养液中的酵母可能会沉淀到培养瓶的下部。采样时如果取原液底部，统计数据可能过大，取原液顶部，统计室数据会过小，采样前需要摇匀。清洗计数板时，先用洗液浸泡，再用清水冲洗干净。冲洗过程中不要擦拭计数室，以免磨损计数室的格栅。
■回答(4)取样前将培养液摇匀。
培养后期的样品溶液稀释后再计数(5)浸泡洗涤。
从上面可以看出，近几年的高考题都侧重于血细胞计数板的使用目的、步骤和注意事项，计数过程中涉及的计算并未涉及。所以下面对真正的高考题涉及的考点进行分析总结，并介绍不涉及的具体计算题。
■二、血细胞计数板的结构
血细胞计数板是一种厚厚的特制载玻片，载玻片上有四个凹槽，形成三个平台。中间的平台很宽，被一条短的横槽分成两半，每一半刻有一个方形格子(图1)。格子上刻着9个大方块，其中只有中间一个是计票室(图2)。这个大正方形的长宽为1 mm，深度为0.1 mm(盖玻片覆盖后的计票室高度)，体积为0.1 mm3。每个大方块分为25个中间方块，每个中间方块又分为16个小方块(25×16型)，如图3所示。
■例1是关于“探索培养液中酵母数量的动态变化”的实验，正确的说法是()
A.改变培养基的pH值不会影响k值(环境容量)
用取样法调查玻璃容器中酵母数量的变化。
c、取适量培养液滴在普通载玻片上，计数酵母菌。
D.营养条件并不是影响酵母种群变化的唯一因素。
分析营养物质、空间、温度、有毒排泄物是影响种群持续增长的限制因素，pH值的变化会影响酵母菌的生长。计数酵母菌时，应使用血细胞计数板作为取样方法。酵母体积小，计数需要在显微镜下进行，所以不能直接观察玻璃容器中的酵母数量。
■答案d
■第四，计数原则
(1)如果一个小方块内酵母菌太多，难以计数，应稀释培养液，以利于酵母菌计数。
(2)活酵母有出芽现象。如果出芽体达到母细胞的一半大小，可以算作两个菌体，如果出芽体小于母细胞的一半，就是1个酵母细胞。
(3)对于压在网格边界上的酵母，应统计同一侧相邻两侧的细菌数。一般可以采用“数不数，数左不数右”的原则，另外两边不算。计数时，如果使用16×25大小的计数室，对角取左上、右上、左下、右下细胞(即100个细胞)中的酵母菌数(如图4黑色部分)；如果计数板的尺寸为25 ×16，除了它的四个对角线方向外，还需要计数一个中间细胞(即80个小细胞)的酵母菌数(如图5黑色部分)。
16×25计数板中酵母细胞数/1毫升= 100小方细胞总数/100× 400× 1000×稀释倍数；25×16计数板中酵母细胞数/1毫升= 80个小方细胞总数/80× 400× 1000×稀释倍数。
■例2下图显示了不同培养阶段酵母群体、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线。请回答以下问题:某学生在T3采样，计数的酵母菌数明显高于D对应的酵母菌数，可能是由_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _引起的
■分析取样前培养液是否摇匀会影响酵母计数。从曲线上看，从T2到T3，酵母菌数减少，说明培养液中有死酵母菌，用血细胞计数板计数时也计数到死酵母菌，而种群计数是计数活个体数，所以种群数高。对于这一点，我们可以用活染色法，比如亚甲蓝，它在氧化态时呈现蓝色，在还原态时无色，所以活细胞呈现无色；而死细胞是蓝色或浅蓝色的。
■回答:取样时培养液没有摇匀，底部的样品没有染色。细菌的计数包括死细菌。
■巩固培训
1.通常，血细胞计数板用于计数培养基中的酵母。如果计票室是1mm× 1mm的正方形，则由400个小正方形组成。如果一个小方块中酵母菌太多，就很难计数，所以计数前要稀释。如果反复计数后计算出每个小方块平均有5个酵母菌，则10 mL培养基中的酵母菌总数为_ _ _ _ _ _ _ _ _。
2.检验员将1 mL水样稀释10倍后，通过采样检测，检测每mL中的蓝藻数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸少许培养液使其自行渗入计数室，用滤纸吸去多余的液体。已知每个计数室由25× 16 = 400个细胞组成，所含液体总体积为0.1 mm3。
现在观察到计数室显示的A、B、C、D、e5的80个细胞中有n个蓝藻，所以大约有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _个
回答1。稀释度2×108 2。5n×105。