福建生物化学四自考试题
3.指出在下列pH条件下,每个蛋白质在电场中向哪个方向运动,是正极,负极,还是保持原点?
(1)胃蛋白酶(pI 1.0),pH 5.0;
(2)血清白蛋白(pI 4.9),pH 6.0;
(3)α-脂蛋白(pI 5.8),pH 9.0和9.0;
答案:(1)胃蛋白酶pI 1.0 < <环境pH 5.0,带负电,向正极移动;
(2)血清白蛋白pI 4.9 < <环境pH 6.0,带负电,向正极移动;
(3)α-脂蛋白pI 5.8 > >环境pH 5.0,带正电,向负极移动;
α-脂蛋白pI 5.8 < <环境pH 9.0,带负电,向正极移动。
4.蛋白质的变性沉淀是什么?两者的本质区别是什么?
答:蛋白质变性的概念:天然蛋白质受到物理或化学因素的影响后,失去原有的生物活性,并随着理化性质的变化,这种影响称为蛋白质变性。
可变性的本质:分子中各种次级键断裂,使其空间构象由紧密有序状态变为松散无序状态,一级结构不被破坏。
变性后蛋白质的表现:①?生物活性消失;②?理化性质变化:溶解度降低,粘度增加,紫外吸收增加,侧链反应增加,对酶的作用敏感,易被水解。
蛋白质由于其电荷和水膜,在水溶液中形成稳定的胶体。如果在蛋白质溶液中加入适当的试剂,破坏蛋白质中的水膜或中和蛋白质中的电荷,蛋白质胶体溶液就会不稳定而沉淀。沉淀机理:破坏蛋白质的水合膜,中和表面的净电荷。
蛋白质沉淀可分为两类:
(1)可逆沉淀:蛋白质的结构没有明显变化。除去引起沉淀的因素,蛋白质仍能溶解在原溶剂中,保持其天然性质。比如低温下的盐析或乙醇(或丙酮)短时间作用于蛋白质。
(2)不可逆沉淀:蛋白质分子内部结构发生了很大变化,蛋白质变性沉淀,不能再溶解在原溶剂中。如果加热导致蛋白质沉淀,与重金属或某些酸的反应都属于这一类。
蛋白质变性后,有时维持溶液稳定的条件仍然存在,不沉淀。所以变性的蛋白质不一定会出现沉淀,沉淀的蛋白质也不一定有变性。