请在此序列中添加限制性位点MluI、T7启动子序列和上游引物(方向:5’-MLUI-T7-…3’)!!!

ACG CGT aattctaatagactcactatagg GAAAATAGTGCCCAAAGAGT

mlui 75’特异性序列

另外,最好在限制性位点前加一个保护碱基,比如“GC”。