红果考研真题评价

1.1)提取含有水解酶基因的细菌基因组,

2)用限制性内切酶将其基因组切割成几个片段,用相同的限制性内切酶在大肠杆菌质粒上切一个缺口,将每个DNA片段导入质粒。

3)将质粒导入大肠杆菌,包被并在含有底物A的平板中培养,表达质粒基因。如果有的菌落是棕色的,说明菌落中有水解酶基因。

2.病毒进化的主要工具是基因突变,基因突变是病毒变异的根本原因,突变也是病毒适应环境、谋求生存的重要方式。突变是基因进化的基础。作为一个独立的生物群体,病毒的进化必然符合达尔文的自然选择理论。为了生存和更好地适应环境,病毒必然会在多样性上发生突变。病毒的变异和进化具有不同于普通细胞生命的特征。比如它的速度比普通生命快很多。SARS病毒研究预测,SARS冠状病毒的大致年龄为230岁,其范围约为195 ~ 265年,是多细胞生命进化速度的近万倍。因此,病毒的变异和进化一直是病毒学的重要组成部分。

病毒进化和变异的主要方式有:

1.病毒基因突变的一般特征:病毒每天复制数以亿计,RNA病毒转录酶没有校对功能,其错配率从十万分之一到十万分之一,远高于宿主细胞。由于DNA(脱氧核糖核酸)病毒聚合酶具有纠错功能,其突变率远低于RNA病毒,但也远高于宿主细胞。然而,乙型肝炎病毒(HBV)的复制通过前基因组RNA中间体被逆转录成负链DNA。逆转录是利用病毒自身的DNA聚合酶进行的,缺乏校对功能,突变后难以纠正,导致复制过程中逆转录失真。所以它的突变比其他DNA病毒高4个数量级,比RNA病毒低1 ~ 2个数量级。高速复制和高突变率增加了病毒的遗传多样性,为其突变进化提供了第一条件。点突变通常发生在密码子第三个核苷酸,多为非表型突变,而密码子第一和第二个核苷酸的突变可能引起氨基酸的改变,关键位置核苷酸突变引起的错义突变可能影响病毒的复制和病毒蛋白的表达。如果这里的核苷酸参与重叠的开放阅读框,那么单个位点的突变就可以改变两个开放阅读框。突变可以导致抗原位点关键位置的氨基酸发生取代,从而导致蛋白质形成新的构象,产生新的抗原性。突变的方式多种多样,包括核苷酸转化、颠换、插入、缺失、分子内重组、核酸片段间的再结合、病毒基因与宿主基因的整合等。病毒与宿主核酸的相互作用可以迅速扩大病毒核酸的多样性。例如,病毒癌基因(v n癌基因)存在于宿主核酸上;在黄病毒基因组中发现了宿主泛素等核酸成分的插入,等等。

2.基因突变和跨宿主进化

一般来说,所谓的新病毒,除了少数是在自己的宿主中发生了变异之外,大部分都是因为宿主的改变而产生的。在同一组宿主中,为了使病毒和宿主和谐发展,病毒的毒性会趋于缓和。因此,大多数致命病毒如SARS和禽流感起源于改变宿主基因的突变和进化。由于宿主的变化,病毒在物种间跨宿主传播越来越严重。SARS、禽流感、HIV-1和HIV-2都是由非人类病毒进化而来。非典是广东人吃果子狸和蓝孔雀引起的,禽流感是人类长期喂养和接触禽类引起的。HIV-1通过种间屏障从黑猩猩传播给人类,HIV-2病毒通过人类食用白眉传播。

虽然简单的突变使病毒避免了宿主免疫系统的杀伤,但病毒的快速突变也限制了病毒的大小。一般RNA病毒的突变速度比DNA病毒快一两个数量级,所以RNA病毒的最大尺寸也比DNA小一个数量级,这就限制了病毒的进化和功能。

3.遗传物质的水平传播与病毒进化。

病毒和宿主之间也会有遗传物质的交流。病毒进入细胞后,同样的病毒也会进入。它们之间的基因交换不仅可以“交流经验”,还可以“追根溯源”,从而交换变异过程中丢失的有用基因。

病毒学论坛,免费学术论坛,病毒学,通讯,病毒,病毒学,细胞,免疫oy和培养病毒可以通过基因组片段的重组或再关联来交换遗传信息,这是病毒在自然选择过程中继续生存所必需的。两种或多种病毒同时感染宿主细胞为病毒间遗传信息的交换提供了机会。此外,病毒和细胞基因组之间也存在遗传信息的交换,许多病毒基因组中存在高度同源的序列就是最好的证明。这种遗传信息的交换在病毒进化中起着重要的作用。

3.可能性:由于1)琼脂糖凝胶电泳的分辨率有限,分子量相近的不同核酸片段可能在同一条带;2)可能性:因为DNA的分子构象可能不同,我们做过一个实验,质粒DNA的酶切反应最快,因为是高度螺旋,所以运动阻力小。可以想象,如果有足够多的小DNA,