生物选修课的一个知识点小结
高中生物选修课的一个知识点:DNA的粗提取与鉴定。提取DNA的溶解原理包括:DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。
DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解特性如下:溶解度最低,为0.1.4mol/L;要溶解DNA,需要更高的浓度?为了沉淀DNA,需要0.1.4 mol/L的浓度?
在溶解细胞中的DNA时,人们通常选择2mol/LNaCl溶液;分离出DNA分子的方法是将蒸馏水缓慢注入溶解有DNA的NaCl溶液中,以稀释NaCl溶液。酒精是常见的有机溶剂,但DNA不溶于酒精(尤其是95%冰镇酒精),而细胞中的蛋白质溶于酒精。
理论上,预冷的乙醇溶液具有以下优点。一是抑制核酸水解酶的活性,防止DNA降解;二是减少了分子运动,容易形成沉淀;第三,低温有利于增加DNA分子的柔性,减少断裂。
利用DNA不溶于酒精的原理,可以达到进一步分离DNA和蛋白质的目的。
DNA对酶、高温和去污剂的耐受性原理也可用于提取DNA。运用这一原理时,应选择蛋白酶,因为酶是专一的,蛋白酶只水解蛋白质而不影响DNA。温度值为60 ~ 80℃,因为这个温度值蛋白质变性沉淀,而DNA不变性。
补充:DNA变性是指DNA分子在高温下解链,其温度在80℃以上。比如在PCR技术中,DNA变性温度是95℃。
在鉴定提取的物质是否是DNA时,应该用什么指标进行鉴定?
答:在沸水浴条件下,DNA遇到二苯胺会出现蓝色。
原理总结:用不同浓度的NaCl溶液溶解或沉淀DNA,可以从细胞中提取和纯化DNA;然后用酒精进一步分离DNA和蛋白质,达到纯化的目的;最后用二苯胺试剂鉴定提取物质是否为DNA。
实验材料的选择:
不同的生物体组织中的DNA含量不同。选材时要遵循DNA含量高、取材容易、提取容易的原则。
本实验使用鸡血细胞作为实验材料有两个原因。一是因为鸡血核DNA含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞容易吸水爆裂,而用动物肝细胞做实验材料往往需要匀浆离心,设备要求高,操作复杂,耗时长。
鸡血细胞释放的DNA很容易被玻璃容器吸附,所以为了减少DNA在提取过程中的损失,最好用塑料烧杯和试管盛装鸡血细胞液。
破碎细胞,得到含有DNA的滤液;
如果选择鸡血和洋葱作为实验材料,如何获得含有DNA的滤液?
答案:在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,用玻璃棒搅拌,过滤,收集滤液;将洋葱切碎,加入一定量的洗涤剂和盐,搅拌研磨,过滤,收集滤液。
为什么加入蒸馏水会使鸡血细胞破裂?
答:蒸馏水是鸡血细胞的低渗液体。大量的水可以进入血细胞,导致它们破裂。再加上搅拌的机械作用,加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),从而释放出DNA。
在上面的实验中,加入蒸馏水、洗洁精和盐的作用是什么?
答:过滤要选择滤纸和尼龙布。血细胞大量吸收蒸馏水中的水分而破裂;洗涤剂分解细胞膜;盐溶解DNA物质;过滤选用尼龙布。
处理植物组织时研磨的目的是什么?研磨不充分的结果是什么?
答:破壁,使核物质容易溶解在NaCl溶液中;研磨不充分会减少DNA提取量,影响实验结果,导致二苯胺鉴定时无丝状沉淀,无蓝色。具体做法。10mL鸡血+20mL蒸馏水?同向搅拌?三层尼龙布过滤?过滤。
为什么反复溶解沉淀DNA可以去除杂质?
答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,可以去除高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度沉淀DNA,可以去除溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解和沉淀DNA,可以除去与DNA具有不同溶解度的各种杂质。
最初的DNA滤液含有蛋白质和脂质等杂质,因此需要进一步纯化。
第一种方案的原理是DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同;
第二种方案的原理是蛋白酶分解蛋白质而不分解DNA
方案3的原理是蛋白质和DNA具有不同的变性温度。
方案二和方案三有什么区别?
答:第二种方案是用蛋白酶分解杂质蛋白,使提取的DNA与蛋白分离;方案三利用了DNA和蛋白质耐高温的差异,从而使蛋白质变性,与DNA分离。
沉淀和识别:
滤液中还有一些杂质。如何去除这些杂质?得到的DNA是什么颜色?
答:将滤液与等体积的冷却酒精混合,静置2 ~ 3分钟。分离出来的白色丝状物是DNA。DNA是白色的。
如何鉴别沉淀的白色细丝是DNA?
答案:具体做法:2支试管,编号A和B?加入等量的5mLNaCl溶液?往指甲里放少量白丝溶解?各加入4mL二苯胺,混匀?沸水浴5min分钟?观察颜色变化。
实验操作:
制备鸡血细胞溶液,加入柠檬酸钠,静置或离心。
?
打破细胞释放DNA?加入蒸馏水,沿同一方向快速搅拌。
过滤除去细胞壁和细胞膜。
溶解细胞核中的DNA,加入NaCl至2mol/L,同方向缓慢搅拌。
?
加入蒸馏水至0.1.4 mol/L用于DNA沉淀,过滤,溶解于2mol/L溶液中。
去除细胞质中的大部分物质。
将初步纯化的DNA与相同体积的95%冷酒精混合以沉淀白色细丝。
去除核蛋白、RNA、多糖等。
二苯胺的DNA鉴定,沸水浴,蓝色
注意事项:在鸡血中加入柠檬酸钠,防止凝固;将鸡血静置或离心以增加细胞悬浮液浓度;使用塑料烧杯;用尼龙布过滤;玻璃棒以相同的方向搅拌;玻璃棒要慢慢搅拌(细胞破碎,快速搅拌);玻璃棒不应接触烧杯壁;目前应该制备二苯胺试剂。
高中生物选修课一个知识点:制作果酒和果醋1、发酵:通过微生物技术的培养,产生大量代谢产物的过程。
2.好氧发酵:醋酸发酵和谷氨酸发酵。
厌氧发酵:酒精发酵、乳酸发酵。
3.酵母是一种兼性厌氧微生物真菌。
酵母的繁殖方式:芽殖繁殖(主要)、分裂繁殖和孢子繁殖。
4.在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖。C6H12O6+6O2?6CO2+6H2O
5.在厌氧条件下,酵母可以发酵酒精。C6H12O6?2C2H5OH+2CO2
6、20℃左右最适合酵母繁殖,酒精发酵时温度一般控制在18℃-25℃。
7.在葡萄酒的自然发酵过程中,附着在葡萄皮表面的野生酵母起着主要作用。
在发酵过程中,随着酒精浓度的增加,红葡萄皮中的色素也进入发酵液中,使葡萄酒呈现深红色。
酵母可以在厌氧酸性发酵液中生长繁殖,但其他大多数微生物因为不能适应这种环境而受到限制。
8.醋杆菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型为异养好氧,繁殖方式为二元分裂。
9.当氧和糖源充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;没有糖源时,醋酸菌把乙醇变成乙醛,然后乙醛变成醋酸。2C2H5OH+4O2?CH3COOH+6H2O
10,控制发酵条件的作用:
①醋杆菌对氧含量特别敏感。进行深层发酵时,即使短时间中断供氧,醋酸菌也会死亡。
②醋酸菌的最适生长温度为30 ~ 35℃。控制发酵温度可以缩短发酵时间,减少杂菌污染的机会。
③生产乙酸的方法有两种:直接氧化法和以酒精为底物的氧化法。
11,实验过程:选葡萄?涮?果汁?酒精发酵?果酒(?醋酸发酵果醋)
12.酒精测试:果汁发酵后是否有酒精产生,可用重铬酸钾测试。在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应呈灰绿色。首先在试管中加入2mL发酵液,然后滴加43滴浓度为3mol/L的H2SO43,摇匀。最后滴3滴室温饱和的重铬酸钾溶液,摇动试管观察颜色。
13.充气口连接充气泵,用于醋酸发酵时充气;排气口用于排出酒精发酵过程中的二氧化碳;排放口用于取样。
排气口要通过长而弯曲的软管与瓶体相连,其目的是防止空气中的微生物污染。向下开口的目的是为了方便二氧化碳的排出。使用该装置酿酒时,应关闭通气口;做醋时,进气口要接气泵输入氧气。
高中生物选修课一个知识点:制作腐乳1。多种微生物参与豆腐的发酵,如青霉菌、酵母菌、曲霉、毛霉等。,其中毛霉起主要作用。毛霉是一种丝状真菌。代谢型为异养好氧型。繁殖方式为孢子繁殖。过着堕落的生活。
2.原理:毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小肽和氨基酸;脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
3.实验过程:让毛霉长在豆腐上?腌制?把腌好的汤装瓶?密封固化
4.腐乳的主要制作工艺是前期发酵豆腐,后期发酵豆腐。
早期发酵的主要功能:
1.为毛霉的生长创造条件。
2、使毛酶形成菌膜包裹豆腐,使腐乳成型。
后发酵主要是酶和微生物协同参与生化反应的过程。腐乳的香气是通过各种辅料和酶的缓和而产生的。
5.豆腐切成3cm?3cm?1cm的部分块。所用豆腐的含水量在70%左右,如果水太多,腐乳就不容易成型。
水分测定方法如下:准确称取5 ~ 10g(精确至0.02mg)研钵中研磨成糊状的样品,置于已知重量的蒸发皿中,铺匀,在100 ~ 105℃的电烘箱中干燥4h,取出,冷却至室温,称重,然后干燥30min。
计算样品水分含量(%)的公式如下:
(干燥前的容器和样品质量如何?干燥后容器和样品的质量)/干燥前样品的质量
毛霉的生长:条件:将豆腐块放入笼中,控制笼内温度在15 ~ 18℃并保持一定温度。
来源:1。空气中的毛霉孢子;2.直接接种优良毛霉种
时间:5天
腌制:将盖好毛霉的豆腐块分层有序地放入瓶中,同时分层加盐。随着层数的增加,盐的量会增加,靠近瓶口表面的盐会更厚。腌制时间为8天左右。
用盐腌制时,要注意控制盐的用量:盐的浓度过低,抑制不了微生物的生长,可能导致豆腐腐败变质;盐浓度过高会影响腐乳的口感。
盐的作用:1。抑制微生物生长,避免腐败变质;2.水的沉淀是豆腐的硬化,在后期制作过程中不易酥烂;3.调味,赋予腐乳必要的咸味;4.毛酶菌丝体中蛋白酶的提取。
卤汤的准备:卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。罐头汤是由酒和各种香料制成的。卤水汤中酒的含量一般控制在12%左右。
酒的作用:1。防止杂菌污染,防止腐蚀;2.与有机酸结合形成酯,赋予腐乳风味;3.腐乳后期酒精含量与发酵时间有很大关系。酒精含量越高,对蛋白酶的抑制作用越大,腐乳的成熟时间越长。酒精含量过低,蛋白酶活性高,会加速蛋白质水解,杂菌繁殖快。豆腐易腐难块。
香料的作用:1。调味功能;2.杀菌消毒;3.参与并促进发酵过程