生物学问题——PCR
PCR的全称是:聚合酶链式反应,也就是俗话说的,人为制造一个环境来复制和扩增双链基因片段。
目标基因:要扩增的基因片段。
变性:就是在高温环境下融化双链,一般需要94摄氏度。
引物:引导复制开始的单链RNA片段,可以引导复制的开始。
聚合酶:Taq酶是在火山口发现的耐热酶。在它的作用下,四种脱氧核苷酸(dNTP)被用作合成双链的原料。
延伸:一般来说,就是原来的模板链和新合成的单链形成新的双链的过程。延伸时间的长短和温度会影响新双链的质量。
PCR的一般过程
1,模板DNA
2.(第一个循环):模板DNA变性和引物复性。
3.(第一轮):引物延伸
4.(第二循环):新合成的双链变性和引物复性。
5.(第二个循环):引物延伸。
……
以此类推,直到结束。
之后可以浸泡在琼脂糖电泳中看扩增情况,也可以测量OD值计算浓度。
现在有实时PCR和实时定量PCR,可以等间隔的测量反应物的浓度,得到相对准确的数据,比较简单。
总的来说,做分子生物学实验是个烧钱的工作。