历届高考生物真题
(1)四种是这样来的:
图1直线段分解如下。
- B B - H H - B B -
- B B - H H - B B -
1 2 3 4
(2)如上所示,只要来自同一限制性位点的粘性末端可以互补。
先看质粒上这两种酶的酶切位点,这样把质粒切成两段,但有效片段是一个长片段(图中所示的长片段质粒的母本可以通过电泳分离得到)。
所谓“重组”质粒是指在质粒(母体)片段中间插入外源片段的质粒。
这样,如果将切割的长片段质粒和线性片段混合在一起,片段2和片段3都可能与质粒重组,筛选后可以得到两种质粒。当然也有其他的可能,比如片段2和片段3再次连接成一个二元片段,但这样的片段无法通过筛选获得,会发生质粒自连接并被筛选,但可以通过进一步的质粒大小检测来鉴定。
其实这个问题太绝对了。理论上有可能片段2和3是连在一起的,然后连接到质粒上。虽然概率低,但是说不出来也是不可能的。无论哪种方式,都会被识别出来。一般认为形成两种考虑太复杂。
如果用Bst l和BamH l代替,相当于单一限制(因为这两种酶的限制位点是一样的),所以
1)质粒用一个口(两个粘性末端)切割。
2)将线性片段切成三段(尽量自己画),只有中间一段有粘性末端才能与质粒重组。
当1)和2)混合在一起,粘性末端相互连接时,只能形成一个重组质粒。