2010江苏高考生物第27题填空(4)

2.越高(因为Sma I识别G-C G-C序列，GC之间有三个氢键，比有两个氢键的AT具有更高的热稳定性，所以Sma I切线越多，质粒中GC碱基对越多，整体热稳定性越高。

3.因为SmaI切割后没有附着端(像前三种酶切割后有一个短的不成对碱基)，不能与外源DNA结合，SmaI的切割点在外源DNA的目的基因中，会破坏目的基因。

4.防止外源DNA和质粒切割后自循环。

5.DNA连接酶

6.筛选成功加入目的基因的质粒(其实我觉得这里有点问题，因为一般是加入前后不一致来筛选，即如果质粒含有抗性基因，那么有效切点应该位于抗性基因内部，像smaI切点。这样，成功接入外源DNA后，抗性基因被灭活，细菌就无法再在含有抗生素的培养基中存活，从而区分连接成功与否。所以顾名思义，这个抗性基因是没用的)

7.蔗糖是一种单一的营养来源(成功引入可以存活)