分子生物学中的问题-关于lac启动子:)

Lac启动子:来源于大肠杆菌的乳糖操纵子，是DNA分子上的定向核苷酸序列，由一个阻遏蛋白基因(LacI)、一个启动子基因(P)、一个操纵子基因(O)和一个编码乳糖利用相关的三种酶的基因结构组成。Lac启动子受分解代谢系统正调控，受阻遏物负调控。正调控通过CAP(分解代谢物基因激活蛋白)因子和cAMP激活启动子，促进转录。负调控是调控基因产生LacZ阻遏蛋白，可与操纵基因结合阻止转录。乳糖和一些类似物，如IPTG，能与阻遏蛋白形成复合物，改变其构型，不能与O基因结合，从而解除这种阻遏，诱导转录。谈一些相关知识:

启动子是DNA链上能与RNA聚合酶结合并启动RNA合成的序列。它是基因表达不可缺少的重要调控序列。没有启动子，基因就不能被转录。因为细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子，所以原核表达载体中使用的启动子必须是原核启动子。

原核生物的启动子由两个分离的高度保守的核苷酸序列组成，这对mRNA的合成非常重要。在转录起始点上游5 ~ 10 BP处，有一个由6 ~ 8个碱基组成的富含A和T的区域，称为Pribnow盒，也称为TATA盒或-10区。来自不同启动子的Pribnow盒碱基序列略有变化。在转录起始位点上游35 bp处，有一个由10 bp组成的区域，称为-35区。大肠杆菌的RNA聚合酶在转录过程中识别并结合启动子。-35区与RNA聚合酶的S亚基结合，-10区与RNA聚合酶的核心酶结合。在转录起始位点附近，DNA解卷形成单链，RNA聚合酶使第一个和第二个核苷酸形成磷酸二酯键，然后在RNA聚合酶的作用下向前推进，形成新的RNA链。

原核表达系统中常用的调控启动子有Lac(乳糖启动子)、Trp(色氨酸启动子)、Tac(乳糖和色氨酸的杂合启动子)、lPL (l噬菌体的L左旋启动子)、T7噬菌体启动子等。

启动子是DNA链上能与RNA聚合酶结合并启动RNA合成的序列。它是基因表达不可缺少的重要调控序列。没有启动子，基因就不能被转录。因为细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子，所以原核表达载体中使用的启动子必须是原核启动子。

原核生物的启动子由两个分离的高度保守的核苷酸序列组成，这对mRNA的合成非常重要。在转录起始点上游5 ~ 10 BP处，有一个由6 ~ 8个碱基组成的富含A和T的区域，称为Pribnow盒，也称为TATA盒或-10区。来自不同启动子的Pribnow盒碱基序列略有变化。在转录起始位点上游35 bp处，有一个由10 bp组成的区域，称为-35区。大肠杆菌的RNA聚合酶在转录过程中识别并结合启动子。-35区与RNA聚合酶的S亚基结合，-10区与RNA聚合酶的核心酶结合。在转录起始位点附近，DNA解卷形成单链，RNA聚合酶使第一个和第二个核苷酸形成磷酸二酯键，然后在RNA聚合酶的作用下向前推进，形成新的RNA链。

原核表达系统中常用的调控启动子有Lac(乳糖启动子)、Trp(色氨酸启动子)、Tac(乳糖和色氨酸的杂合启动子)、lPL (l噬菌体的L左旋启动子)、T7噬菌体启动子等。

闪耀达尔加诺序列

1974年，Shine和Dalgarno首先发现mRNA上有核糖体结合位点，是起始密码子AUG和一个由3 ~ 9 bp组成的序列，位于AUG上游3 ~ 10 bp，这个序列富含嘌呤核苷酸，正好与16S rRNA 3？末端富含嘧啶的序列是互补的，是核糖体RNA的识别和结合位点。该序列将被命名为Shine-Dalgarno序列，简称SD序列。它与起始密码子AUG之间的距离是影响mRNA转录和翻译成蛋白质的重要因素之一。一些蛋白质与SD序列的结合也会影响mRNA与核糖体的结合，从而影响蛋白质的翻译。此外，真核基因的第二个密码子必须紧接在ATG之后才能产生完整的蛋白质。

终结者

在一个3的基因里？运算符的结尾还是3？末端通常具有特定的核苷酸序列，并具有终止转录的功能。这个序列被称为转录终止子，或简称为终止子。转录终止过程包括:RNA聚合酶在DNA模板上停止，RNA延伸在终止信号上停止，转录后的RNA从RNA聚合酶上释放出来。强终止RNA聚合酶的终止子有一些结构上的相似性，即有一个富含A/T的区域和一个富含G/C的区域，富含G/C的区域具有回文对称性。该终止子转录后形成的RNA具有茎环和一串对应于A/T富集区的U。转录终止机制复杂，结论不统一。然而，在构建表达载体时，为了稳定载体系统和防止克隆的外源基因的表达干扰载体的稳定性，通常在多克隆位点的下游插入rrB核糖体RNA的强转录终止子。