2017化验员资格考试知识巩固:细菌和抗原检测
(1)直接涂片镜检
直接从患者标本涂片用于染色显微镜检查是一种简单快速的方法。从某一部位采集标本进行直接检验,要考虑细菌的形态特征和可能的细菌数量。脑膜炎患者脑脊液和瘀斑穿刺涂片常可显示细胞内革兰阴性肾球菌,具有诊断价值。
白喉患者咽部伪膜涂片可见典型杆菌,有时可有异染颗粒,也有参考诊断价值。结核病人痰直接或浓缩后涂片抗酸染色检测结核分枝杆菌具有诊断价值。在少数情况下,免疫荧光或酶标抗体染色显微镜也用于快速诊断,如粪便样本中的霍乱弧菌和痢疾志贺氏菌,可通过该技术检测。
(2)培养
大多数细菌在形态和染色上没有特征,因此需要通过培养来分离和鉴定细菌。这种方法虽然耗时长,但是可靠。
此外,只有通过这种方法才能获得细菌的纯培养物,可用于药物敏感性试验或毒性试验。细菌应根据其营养、生长条件(如厌氧或CO2)和菌落生长特征进行初步鉴定。溶血性链球菌如需在血琼脂平板上生长,菌落小而透明,菌落周围有完整的溶血圈,可用于鉴别。大多数细菌需要进一步培养,接种各种特殊培养基进行生化反应试验或确定其抗原性和致病性。
(3)生化反应
医学教育在细菌合成和分解代谢过程中|净收集整理,有些物质可以被酶利用或分解。不同的细菌有不同的酶,所以各种细菌能利用和分解的物质也不同。利用各种细菌的不同生化反应来帮助鉴定细菌,是肠杆菌等一些细菌的重要步骤。比如肠杆菌都是革兰氏阴性杆菌。菌落形态相似,但糖的发酵结果不同,可以用不同种类的糖作为生化反应的培养底物来区分。
(4)抗原检测和分析
有些细菌即使通过生化反应也难以区分,但其细菌抗原成分(包括细菌抗原和鞭毛抗原)是不同的。利用已知的特异性抗体来确定是否存在相应的细菌抗原,可以确定菌株或类型。
常用的方法是玻片凝集反应。用已知的特异性免疫血清与玻片上的待鉴定细菌进行凝集反应。如果出现凝集菌落,则为阳性,说明该细菌有相应的特异性抗原。近年来,各种敏感的方法被用于检测抗原,如对流免疫电泳、放射免疫分析、酶免疫分析和气相色谱,试图直接从患者标本中检测细菌抗原,以进行快速诊断。
如在细菌性脑膜炎中,可通过对流免疫电泳在脑脊液中分别检测肺炎球菌、脑膜炎球菌和流感杆菌,具有较高的特异性和敏感性。气相色谱方法系列利用细菌代谢产生的挥发性短链有机酸,通过气相色谱分析鉴定细菌,广泛应用于厌氧菌。
抗原检测的另一个好处是,经过抗生素处理后,细菌的生长受到抑制,培养方法检测不到的细菌,由于抗原的存在,仍然可以在短时间内检测出来,有助于明确病因。在某些情况下,噬菌体还可用于分析细菌抗原类型,以进行流行病学随访调查。